DB2305∕T 033-2024 玉米茎基腐病抗性筛选及鉴定技术规程(双鸭山市)
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0.24 |
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9 |
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日期： |
2024/10/20 |
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ICS 65.020.20,CCS B 16 DB2305,双鸭山市地方标准,DB2305/T 033—2024,玉米茎基腐病抗性筛选及鉴定技术规程,2024-08-30 发布2024-09-30 实施,双鸭山市市场监督管理局发布,DB2305/T 033—2024,I,前言,本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起,草,请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任,本文件由双鸭山市农业农村局提出并归口,本文件起草单位：宝清县小城子镇乡村振兴发展服务中心、黑龙江省农业科学院佳木斯分院、芜湖,职业技术学院、宝清县朝阳镇乡村振兴发展服务中心,本文件主要起草人：邱磊、杨晓贺、顾鑫、于昌红、丁俊杰、毕永彬、蒋佰福、牛忠林、吴丽丽、,靳晓春、李如来、刘伟、王庆胜、李志民、李增杰、朱宝国、姚亮亮、张茂明、王自杰、张家智、高雪,冬,DB2305/T 033—2024,1,玉米茎基腐病抗性筛选及鉴定技术规程,1 范围,本文件规定了玉米茎基腐病抗性筛选及鉴定技术的术语和定义、接种圃设计、接种方法、抗性评价、,田间档案的技术要求,本文件适用于玉米茎基腐病的田间筛选及鉴定,2 规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件,GB 4404.1 粮食作物种子第1 部分:禾谷类,NY/T 1248.7 玉米抗病虫性鉴定技术规范第7 部分:镰孢茎腐病,DB23/T 017 玉米生产技术规程,3 术语和定义,NY/T 1248.7 界定的及下列术语和定义适用于本文件,3.1,玉米茎基腐病,玉米茎腐病又称青枯病、萎蔫病、茎基腐病，是成株期茎基部腐烂病的总称，属世界性病害。由禾,谷镰孢菌、轮枝镰孢菌和腐霉菌等多种病原菌单独或复合侵染引起的土传病害。玉米散粉至成熟期的气,候条件，特别是雨量与发病关系十分密切，高温、高湿利于发病，雨后暴晴，常出现发病高峰,3.2,病原菌形态特征,玉米茎基腐病是由多种病原菌引起的土传病害，其中包括真菌和细菌,真菌型茎基腐病的主要病原菌有腐蠹菌、镰刀菌和炭疽菌等。腐霉菌的形态特征包括菌丝发达、无,隔、白色棉絮状，孢子囊丝状体不规则膨大，藏卵器平滑，卵孢子球形、光滑。镰刀菌则产生分生孢子,其有性型为子囊菌，分生孢子镰刀形，无色透明，有3 或5 个分隔。炭疽菌的形态特征包括分生孢子盘、,分生孢子单胞、暗色或无色等,细菌型茎基腐病的病原菌包括菊欧文氏菌玉米致病变种和玉蜀黍假单胞菌假单胞菌，它们的菌体杆,状，两端钝圆，革兰氏染色阴性，周生鞭毛，无芽孢和荚膜,DB2305/T 033—2024,2,4 接种圃设计,4.1 病圃选择,应选择光照充足、地势平坦、耕层深厚，肥力较高，保水保肥性能好，排灌良好的地块。以保证玉,米种质资源后期正常生长并完成田间筛选与鉴定,4.2 田间设计,将获得的玉米现有推广品种及玉米自交系随机排列种植，每隔50 份材料设置1 组已知抗病、感病,对照材料，对照选用玉米自交系齐319(高抗)、掖478(高感)。鉴定设计符合NY/T 1248.7 标准,玉米材料采用双行区种植，小区行长4 m，行距0.68 m，植株密度为5000 株/667m2,4.3 田间播种,应在耕层5 cm～10 cm 地温稳定通过7 ℃～8 ℃，土壤含水量25 %～30 %适时播种，也可根据当,年农业生产气候条件适当调整播种期。播种时期符合DB 23/T 017 标准,所种植种子不进行任何处理，播种方式采用人工播种，穴距19.6 cm，每穴播2 粒，出苗后每穴保,留1 株健康的植株。种子符合GB 4404.1 标准,4.4 间苗定苗,玉米3 叶间苗，5 叶定苗,4.4 中耕管理,田间管理及虫草害防治与大田生产相同，田间管理过程中不使用对茎基腐病有防治作用的药剂，生,产过程符合DB23/T 017-2008 标准,5 接种方法,5.1 病菌采集,5.1.1 采样地点选择,在双鸭山市玉米茎基腐病高发区域进行采样，获取具有代表性的病害样本,5.1.2 样本采集,在发病部位采集玉米茎秆及维管束组织,DB2305/T 033—2024,3,5.1.3 样本处理,使用流动的清水轻轻冲洗样本，以去除泥土和表面的杂质,使用无菌的剪刀或手术刀，将玉米茎部从健康区域和病害区域仔细切割开来,病害区域的样本应该,包括可见的病斑及其周围的健康组织，以便于后续的显微观察和病原检测,将切割好的样本分别放入无菌的塑料袋或培养皿中。每个样本应该有明确的标签，记录样本的来源、,采集日期和其他相关信息,使用冰袋或冷藏箱保持样本在适宜的低温条件下，以防止样本变质。在实验室中，样本应按照标准,的微生物检测程序进行处理和分析,5.2 病菌制备,5.2.1 微生物分离,通过稀释培养法和平板对峙法从采集的样本中分离出具有拮抗活性的微生物菌株。具体方法是取病,健交接部分的组织，置于75%的酒精中浸泡2 s～3 s，取出后置于质量体积比为1%的次氯酸钠中浸泡2,min～3 min，再经无菌水换洗，晒干后转移至PDA 平板培养基中，置于25 ℃～27 ℃环境中，黑暗培,养3 d 后挑取病原菌至试管中保存,5.2.2 菌株鉴定,依据柯赫氏法则进行致病力测定，确定其为玉米茎基腐病病原菌的菌株,对分离出的菌株进行形态,学、生理生化特征和分子生物学鉴定进行属种鉴定,从比例占绝对优势的病原菌中选取致病力较强的菌,株作为接种的目标菌株,5.2.3 菌株……
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